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Simoa數(shù)字式單分子免疫陣列分析儀工作原理是怎樣的

更新時(shí)間:2022-05-30      點(diǎn)擊次數(shù):3093
  Simoa數(shù)字式單分子免疫陣列分析儀工作原理:
  采用雙抗夾心聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)實(shí)現(xiàn)極低含量的蛋白定量檢測(cè)。先將捕獲抗體偶聯(lián)到磁珠上,磁珠直徑2.7μm,結(jié)合了抗體的磁珠和目的蛋白結(jié)合,而不與目的分子結(jié)合的磁珠保持無(wú)標(biāo)記物。洗滌磁珠去除非特異性結(jié)合的蛋白,加入酶反應(yīng)底物,磁珠轉(zhuǎn)移到Simoa光盤上,每個(gè)光盤有24個(gè)芯片,而單個(gè)芯片表面有216000個(gè)小孔,每個(gè)小孔的直徑是4.2μm,落入一個(gè)磁珠,去除多余的磁珠并將熒光信號(hào)密封在小孔中。由于反應(yīng)體系極小,比傳統(tǒng)100μl的體系小了20億倍,此時(shí)即使一個(gè)的目的蛋白分子催化底物可以產(chǎn)生足夠的熒光分子被CCD成像系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)字化解讀。
  Simoa數(shù)字式單分子免疫陣列分析儀常見(jiàn)故障出現(xiàn)原因和解決措施:
  1.真空壓力不足:進(jìn)行真空壓力測(cè)試,若測(cè)試結(jié)果正常,可知是因真空傳感器檢測(cè)不到真空壓力引起。該機(jī)的壓力測(cè)試由兩個(gè)傳感器分別檢測(cè)高、低壓力,對(duì)有問(wèn)題的傳感器進(jìn)行調(diào)整或清洗后,再次測(cè)試真空壓力,壓力正常后調(diào)節(jié)傳感器螺絲使高、低壓力指示在規(guī)定范圍內(nèi)。
  2.壓力表指示為零:進(jìn)行真空壓力測(cè)試,能聽(tīng)到泵的工作聲音,但壓力表指示為零。首先檢查廢液瓶所接的真空管,測(cè)試真空壓力,判斷該故障是否因漏氣或壓力表?yè)p壞引起。檢查各管道的接口有無(wú)漏氣,檢查相關(guān)的四只電磁閥(在真空壓力測(cè)試時(shí),這四只電磁閥不工作,為關(guān)閉狀態(tài)),對(duì)有問(wèn)題的管道或電磁閥及時(shí)修復(fù)或者更換。
  3.發(fā)光體錯(cuò)誤:檢查發(fā)光體表面發(fā)現(xiàn)有液體滲出,該故障分三步檢查:檢查廢液探針、相關(guān)管路及清洗池是否有堵塞、漏液;檢查加樣電磁閥、排液電磁閥,電磁閥,有污物會(huì)引起進(jìn)水或排水不暢;檢查與廢液探針管路相連接的堿泵清洗管路是否有漏氣以及堿泵是否有裂縫。
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